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柱层析原理
发布时间:2023-10-08 11:39

柱层析分离,也叫柱层析,具体原理和方法如下:

柱色谱原理:柱色谱的分离原理是根据物质在硅胶上吸附力的不同来分离组分。一般极性较大的物质容易被硅胶吸附,而极性较弱的物质则不易被硅胶吸附。

采用溶剂洗脱时,会发生一系列吸附→脱附→再吸附→再脱附的过程。吸附力较强的组分移动较小的距离并较晚退出柱;吸附力较弱的组分稍后移出柱。移动距离越长,立柱越好。

柱层析分离注意事项

安装立柱时,从下往上安装,先塞棉花。这主要是为了防止石英砂和硅胶的泄漏。然后倒入如图所示数量的石英砂,主要是为了填充柱子下方的空间,并使硅胶柱成为圆柱形,顶部和底部厚度相同。

安装立柱的过程这里不再赘述。安装色谱柱后,加载样品。小心地用移液器沿柱壁打圈,均匀上样。尽量不要损坏硅胶表面。倒入样品后,通过重力让样品完全渗入硅胶中,最后在上面随意倒入一些石英砂。这主要是为了保护已经装样品的硅胶表面,这样以后倒溶剂的时候就不用担心破坏硅胶上表面的平整度了。

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